實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:取硅膠管一根,將一端套在過濾裝置的出液口,另一端套在收集瓶的進(jìn)液口(不銹嘴);再取另一根硅膠管,一端套在收集瓶的抽氣端(白色塑料嘴),另一端通過不銹鋼寶塔接頭與真空泵相連 (1) 試驗(yàn)前,應(yīng)先將濾杯清洗干凈、晾干、取濾膜(50mm)侵泡到純化水里3~5min,濾杯及濾膜支撐網(wǎng)消毒備用(可采用火焰滅菌器快速消毒)。 (2)用鑷子夾住濾膜放在抽濾裝置的濾網(wǎng)上。 (3)將其供試品注入過濾杯內(nèi),然后啟動真空泵,再打開相應(yīng)閥門,實(shí)施過濾集菌。 (4) 供試品過濾集菌結(jié)束后(濾膜上沒有水珠),關(guān)閉真空泵開關(guān),用無菌鑷子取出密封圈,在用無菌鑷子取出濾膜。 (5)將濾膜貼到事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基上,菌面朝上,平貼,不得有氣泡。相應(yīng)的液體培養(yǎng)基注入濾杯內(nèi),培養(yǎng)基覆蓋濾膜表面即可。 (6)蓋上蓋子放置在生化培養(yǎng)箱及恒溫培養(yǎng)箱中,按規(guī)定溫度和時間進(jìn)行培養(yǎng),逐日觀察、計數(shù)。 (7)儀器正常性檢測:取600ml~1200ml純化水,每個濾杯注入100ml純化水,接通真空泵電源,再分別打開相對應(yīng)的閥門,實(shí)施抽濾(抽濾時間1~5min為正常范圍),根據(jù)速度將準(zhǔn)備好的純化水加入濾杯中,純水順暢地從排液口流出,即視為儀器可正常工作,如果過濾速度過慢或無法過濾,請檢查: A.管路連接是否漏氣,濾杯密封性是否良好; B.檢品是否含有較多不溶性的顆粒,懸浮物等; C.檢查不銹鋼網(wǎng)片是否堵塞,不銹鋼底座出液孔是否堵塞。若屬其他原因,請與廠家聯(lián)系。 (8)清洗:儀器長期沒有使用,再次使用前儀器管路應(yīng)對管路進(jìn)行消毒,可采用以下消毒劑:
A乙醇 B新潔爾滅 C甲醛 D次氯酸溶液.消毒方法:準(zhǔn)備100ml消毒劑、200ml無菌水(不需微孔濾膜); 先將100ml消毒劑過濾,保持3~5分鐘,再將200ml無菌水進(jìn)行過濾,即可完成管路消毒。
(9)注意事項(xiàng): a.根據(jù)供試品性狀來選擇濾膜材質(zhì),過濾前后應(yīng)保證濾膜的完整性; b.儀器不工作時,請斷電; c.不能抽濾強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、強(qiáng)氧化劑、強(qiáng)腐蝕等液體; d.當(dāng)供試品中含有不溶性的顆粒,懸浮物時,可能導(dǎo)致濾膜堵塞影響過濾,應(yīng)將供試品進(jìn)行預(yù)處理,除去顆粒或懸浮物; e.抽濾前,應(yīng)確保管道密封性良好.